Preliminary results for genetic transformation of shoot tip of Eucalyptus saligna Sm. via Agrobacterium tumefaciens
DOI:
https://doi.org/10.20873/jbb.uft.cemaf.v2n1.silvaPalavras-chave:
Strain EHA105, GUS gene, Eucalypt, b-glucuronidaseResumo
A regeneração de plantas transgênicas de eucalipto
representa a maior dificuldade para a transformação genética de plantas do gênero Eucalyptus, além de que taxas baixas de plantas transformadas são alcançadas. O objetivo desse trabalho foi avaliar a acetosiringona no meio de co-cultura durante a transformação genética de ápices caulinares de Eucalyptus saligna via Agrobacterium tumefaciens e promover a seleção dos supostos explantes transformados. Ápices caulinares originados de brotações múltiplas foram usados como explantes. Estes explantes foram pré-cultivados por dois dias antes da transformação. A linhagem EHA105 de A. tumefaciens contendo o plasmídeo pBI120 foi utilizada. Os tratamentos foram: 0 e 100 μM de acetosiringona adicionada ao meio de co-cultura, após a co-cultura os explantes foram cultivados em meio de multiplicação suplementado com 250 mg.L-1 de cefotaxima e a cada subcultivo a concentração de canamicina foi aumentada, de 50 até 150 mg.L-1. A expressão transiente do gene uidA nos ápices caulinares foi avaliada no final da co-cultura e após sete dias em meio com canamicina (agente seletivo). A presença de 100 μM de acetosiringona no meio de co-cultura dos ápices caulinares de Eucalyptus saligna promoveu maior expressão transiente do gene uidA e retardou a ação tóxica causada pela canamicina.
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