Brondani, G. E. et al. 51
Vol. 3, N. 1: pp. 51-60, February, 2012 ISSN: 2179-4804
Journal of Biotechnology and Biodiversity
Determinação do teor de carboidratos em minicepas de Eucalyptus benthamii
Determination of the carbohydrates content in Eucalyptus benthamii mini-stumps
Gilvano Ebling Brondani1*, Jonathan Max Emilian Hoffmann2, Antônio Natal Gonçalves1 e Marcílio de Almeida 3
1Departamento de Ciências Florestais, Escola Superior de Agricultura “Luiz de Queiroz”/Universidade de São Paulo - ESALQ/USP; 13.418-900; Piracicaba - SP - Brasil. 2Departamento de Ciências Florestais, Universidade Federal do Paraná - UFPR, 80.210-170, Curitiba - PR - Brasil. 3Departamento de Ciências Biológicas, Escola Superior de Agricultura “Luiz de Queiroz”/Universidade de São Paulo - ESALQ/USP; 13.418-900; Piracicaba - SP - Brasil. *Parte da Tese de Doutorado apresentada ao PPG em Recursos Florestais da ESALQ/USP.
ABSTRACT
The aim of this study was to evaluate the foliar content of soluble carbohydrates non-structural of Eucalyptus benthamii mini-stumps regarding to Zn and B concentrations during successive shoot collections. Shoots were collected from mini-stumps fertigated with nutrient solutions containing different Zn and B concentrations (S1 – free of Zn and B, S2 – 0.5 mg L-1 Zn, S3 – 0.5 mg L-1 B, S4 – 0.5 mg L-1 Zn and B, S5 – 1.0 mg L-1 Zn and B, S6 – 2.0 mg L-1 Zn and B). Eight shoot collection of the clonal mini-garden were performed. The content total of soluble carbohydrates non-structural of leaves (sucrose, glucose and fructose) was determined in the 2nd, 4th, 6th and 8 th
shoot collections. The increasing of the Zn and B concentrations in the nutrient solution induced reduction of the total content of soluble carbohydrates non-structural of leaves, and the fructose was the most affected.
Key-words: Nutritive solution, fertigation, mini-cutting technique, glucose, fructose, sucrose
INTRODUÇÃO
O Eucalyptus benthamii é uma importante espécie para a composição de plantios florestais, principalmente ao considerar a sua tolerância a temperaturas mais baixas e a geadas (Jovanovic e Booth, 2002; Mujiu et al., 2003; Paludzyszyn Filho et al., 2006). Contudo, a multiplicação clonal dessa espécie por meio das técnicas de estaquia (Graça et al., 1999) e miniestaquia (Brondani et al., 2010a; Wit Ondas et al., 2009) não é viável comercialmente até o momento, devido aos baixos índices de enraizamento, sendo necessárias pesquisas na área de biotecnologia visando aumentar os índices de produção de mudas clonais.
As condições nutricionais da minicepa influenciam a rizogênese de propágulos (Alfenas et al., 2004;
Hartmann et al., 2011; Kratz et al., 2011; Taiz e Zeiger, 2009), a qual é dependente da interação entre os fatores endógenos e exógenos (Corrêa et al., 2005; Li et al., 2009; Brondani et al., 2010b; Brondani et al., 2010c; Brondani et al., 2012). Dentre os elementos que podem influenciar a rizogênese de propágulos destacam-se o Zn e B (Kersten et al., 1993; Malta et al., 2002; Scalon et al., 2003), os quais podem ser aplicados via fertirrigação em concentrações controladas em sistemas de minijardins clonais.
Outro aspecto a ser considerado, refere-se aos carboidratos, como a sacarose, glicose e frutose, os quais representam papel crucial para o metabolismo, crescimento e morfogênese das plantas, principalmente pelo fornecimento de energia e carbono para a biossíntese de
____________________________________________
Author for correspondence: gebrondani@yahoo.com.br
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aminoácidos (Pavlinova et al., 2002; Stenvall et al., 2009; Veyres et al., 2008). O acúmulo de carboidratos nos tecidos foliares das plantas também pode variar em relação à época do ano (Kersten et al., 1993; Mindêllo Neto, 2005), fatores edáficos e também de acordo com os tratos culturais (Borba et al., 2005), os quais podem ser exemplificados no sistema de poda contínua de brotações em minijardins clonais de Eucalyptus . Além disso, nas plantas, existe forte interação do nível de carboidratos com o nível hormonal endógeno (Agulló-Antón et al., 2011), afetando desta forma, o processo morfogênico e/ou organogênico (Coruzzi e Zhou, 2001; Komatsu et al., 2011; Kumar et al., 1999; Stenvall et al., 2009; Veyres et al., 2008). A falha na competência de um tecido pode refletir na falta de receptores para a classe de regulador de crescimento que irá induzir o processo organogênico (MacArthur et al., 2009; Papp e Plath, 2011; Smet e Beeckman, 2011), sendo que a inativação de reguladores de crescimento pode ocorrer por meio da conjunção de açúcares derivados da hidrólise da sacarose, glicose e frutose, alterando o balanço das moléculas ativas de auxina e citocinina (Agulló- Antón et al., 2011; Coruzzi e Zhou, 2001).
Devido a função no metabolismo das plantas, os carboidratos podem influenciar a produção de brotações e o posterior enraizamento em propágulos (Hartmann et al., 2011), sejam provenientes da estaquia, miniestaquia ou da microestaquia. Contudo, não existem relatos quanto a determinação de carboidratos em tecidos foliares de minicepas de Eucalyptus benthamii manejadas em minijardim clonal visando a produção de brotações com qualidade adequada para o emprego das técnicas de clonagem.
Com base no exposto, o presente trabalho teve como objetivo determinar os teores foliares de carboidratos solúveis não estruturais (glicose, frutose e sacarose) de minicepas de Eucalyptus benthamii em relação as coletas de brotações e concentrações de Zn e B.
MATERIAL E MÉTODOS
Constituição do minijardim clonal
As unidades experimentais foram compostas por mudas clonais de Eucalyptus benthamii Maiden & Cambage (clones BP101, BP118 e BP120) propagadas pelo processo de miniestaquia com
aplicação de 2.000 mg L-1 de AIB e cultivadas em
vasos plásticos (18 x 16 x 45 cm) com duas aberturas na porção inferior (Figura 1 A). O substrato foi composto por areia, fração fina (0,10 mm < diâmetro de partícula < 0,25 mm), o qual foi peneirado (peneira de malha 3 mm), lavado com água deionizada por cinco vezes e autoclavado
durante 20 minutos a 121°C (≈ 1,0 kgf cm-2), a fim de erradicar plantas daninhas e patógenos, como fungos e bactérias. Previamente ao plantio das mudas nos vasos, procedeu-se a lavagem do sistema radicial das mudas com água deionizada durante 10 minutos, com a finalidade de lixiviar nutrientes e demais componentes aderidos. Os vasos foram suspensos por grades metálicas a 85 cm do solo, sendo plantadas seis mudas por vaso no espaçamento 10 x 8 cm, os quais foram compostos por seis mudas dispostas sequencialmente. Após sete dias efetuou-se a quebra do caule das mudas a 10 cm acima da porção basal, com a finalidade de reduzir a dominância apical e favorecer o crescimento de brotações axilares, as quais foram emitidas aos 21 dias após a quebra do caule (Figura 1 B). Para a formação das minicepas, foi realizada poda da parte aérea a 7 cm acima da base da muda, aos 15 dias após a quebra do caule, conforme metodologia descrita por Brondani (2008), constituindo o minijardim clonal em sistema de vaso (Figura 1 C-D).
Figura 1 - Minijardim clonal de Eucalyptus benthamii. (A) detalhe do vaso contendo areia fina; (B) detalhe da indução de brotações axilares pela quebra do caule aos 21 dias; (C) disposição dos vasos contendo as minicepas aos 50 dias; (D) minicepas emitindo brotações aptas para a coleta aos 50 dias.
Manejo das minicepas
O minijardim clonal foi instalado em condições de casa de vegetação recoberta com polietileno
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transparente e composta por dois sistemas de ventiladores, sendo que os dados da temperatura do ar foram coletados diariamente visando uma possível correlação com as variáveis respostas. A cada sete dias adicionou-se 100 mL de solução nutritiva básica por minicepa (Tabela 1), sendo
realizada irrigação com água deionizada diariamente, visando suprir a perda excessiva por evapotranspiração. A cada semana foi realizada lavagem da areia com água deionizada para evitar o excesso de salinização.
Tabela 1. Composição da solução nutritiva básica para a fertirrigação do minijardim clonal de Eucalyptus benthamii .
Nutriente
Solução Nutritiva *
( mg L-1 )
N-NO3 -
N-NH4 +
60,00 30,00
P 12,00
Ca 40,00
K 80,00
S 10,00
Mg 12,00
Cu 0,10
Fe 2,00
Mo 0,02
Mn 1,60
Fonte de Macro e Micronutriente FQ / PM ( mg L-1 )
Nitrato de potássio (Nuclear®) KNO3 / 101,10 206,85 Monoamônio fostato (Mallinckrodt®) NH4H2PO4 / 115,03 44,57 Nitrato de amônio (Reagex®) NH4NO3 / 80,04 140,50 Cloreto de cálcio (Synth®) CaCl2.2H2O / 147,02 111,13 Nitrato de cálcio (Labsynth®) Ca(NO3)2.4H2O / 236,15 57,18 Cloreto de magnésio (Synth®) MgCl2.6H2O / 203,30 50,46 Sulfato de magnésio (Mallinckrodt®) MgSO4.7H2O / 246,48 60,49 Sulfato de manganês (Ecibra®) MnSO4.H2O / 169,01 4,9223 Sulfato de cobre (Mallinckrodt®) CuSO4.5H2O / 249,68 0,3929 Sulfato de ferro (Synth®) FeSO4.7H2O / 278,02 9,9520 Sódio - EDTA (Nuclear®) Na2-EDTA.2H2O / 372,24 13,3110 Molibdato de sódio (Merck®) Na2MoO4.2H2O / 241,95 0,0504
* O pH foi ajustado para 6,2 a 25°C com ácido clorídrico (HCl) ou hidróxido de sódio (NaOH), ambos a 1M. FQ = fórmula química, PM = peso molecular.
Tratamentos e delineamento experimental Como tratamentos foram aplicados diferentes concentrações de zinco (Zn) e boro (B), os quais
foram fornecidos por meio de solução nutritiva (Tabela 2).
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Tabela 2. Combinação das concentrações de Zn e B para a composição das soluções nutritivas.
Solução Nutritiva Zn(1) ( mg.L-1 ) B(2) (mg.L-1 )
S1 0,0 0,0
S2 0,5 0,0
S3 0,0 0,5
S4 0,5 0,5
S5 1,0 1,0
S6 2,0 2,0
(1) Fornecido na forma de sulfato de zinco (Mallinckrodt® / ZnSO4.7H2O / 287,54). (2) Fornecido na forma de ácido bórico (Ecibra® / H3BO3 / 61,83).
O experimento foi conduzido com base na solução nutritiva apresentada na Tabela 1, variando somente as concentrações dos elementos Zn e B de acordo com as combinações apresentadas na Tabela 2. A cada sete dias adicionou-se 100 mL da solução nutritiva (Tabelas 1 e 2) por minicepa (Figura 1 C-D). O experimento foi conduzido durante 12 meses, sendo realizadas oito coletas sucessivas de brotações com intervalos variando de 21 a 35 dias.
Teor foliar de carboidratos solúveis não estruturais
O experimento foi conduzido no delineamento inteiramente casualizado em arranjo fatorial (4x6) com parcelas subdivididas no tempo, sendo os fatores constituídos por quatro coletas de brotações (2ª, 4ª, 6ª e 8ª coletas) e seis combinações de Zn e B (Tabela 2), com três repetições. As amostras foram constituídas de folhas totalmente expandidas do terço superior da brotação (folhas apicais), sendo que após a coleta, todas as folhas foram lavadas com água deionizada. Para a determinação dos teores foliares de carboidratos solúveis não estruturais (sacarose, frutose e glicose), as folhas foram armazenadas em congelador a -80°C. Os extratos foram obtidos a partir de 160 mg (peso fresco) dos tecidos vegetais congelados. As amostras foram cortadas (tamanho
de 1 mm2) e fervidas em banho maria (10 minutos) seguida de centrifugação (3 minutos a 16.000 RPM) e, por fim, as amostras foram filtradas
(filtro descartável Millex - GP® com membrana
estéril de 0,45 µm) com o uso de uma seringa de 10 mL. Após a filtragem, as alíquotas (eluato) foram completadas a 5 mL e então efetuou-se a leitura dos teores dos carboidratos. O eluato foi analisado por cromatografia de íons IC5000 (Dionex, 2000), usando um detector eletroquímico. Os carboidratos foram separados usando uma coluna analítica Carbo PAC PA100 DIONEX, equipado com uma coluna guarda. Os padrões de glicose, frutose e sacarose (Sigma® ) foram utilizados para determinar as concentrações dos carboidratos (Dionex, 2000; Veyres et al., 2008).
Análise estatística dos dados
Os dados mensurados de todos os experimentos foram submetidos ao teste de Hartley (P<0,05) e Lilliefors (P<0,05) e transformados quando necessário. Em seguida, foi realizada análise de variância (ANOVA, P<0,01 e P<0,05). De acordo com a significância da ANOVA, os dados dos fatores qualitativos foram comparados pelo teste de Tukey (P <0,05).
RESULTADOS
De acordo com a análise de variância houve interação entre a coleta de brotações e solução nutritiva para o teor foliar de sacarose, glicose e total de carboidratos solúveis não estruturais contidos em minicepas de Eucalyptus benthamii . O teor foliar de frutose variou significativamente apenas em relação a solução nutritiva, independente da coleta de brotações (Tabela 3).
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Tabela 3. Resumo da análise de variância para o teor foliar de sacarose (SAC), glicose (GLI),
frutose (FRU) e total de carboidratos solúveis não estruturais (TOTAL) em brotações de minicepas de Eucalyptus benthamii em relação à coleta de brotações e concentrações de Zn e B.
Causas da Variação
GL
SAC (1)
( mg g-1 )
Quadrados Médios GLI(1) FRU (1)
( mg g-1 ) ( mg g-1 )
TOTAL (1)
( mg g-1 )
Coleta (COL) Resíduo-COL
3
8
0,9361 **
0,0727 ns
0,1388 ns
0,0733 **
0,3928 ns
0,1052 ns
0,1426 ns
0,0861 ns
Parcela Solução-SOL
11
5
–
0,2288 **
–
0,0515 ns
–
0,1661 *
–
0,0931 ns
COL*SOL 15 0,2288** 0,0607** 0,0877ns 0,0885 *
Resíduo 40 0,0465 0,0215 0,0620 0,0397
Subparcela 71 – – – –
Média – 0,12 3,57 5,51 9,21
CVexp.(%) – 37,26 16,69 14,24 8,88
ns Valor não significativo ao nível de 5% de probabilidade de erro pelo teste F. * e ** Valor significativo ao nível de 5% e 1% de probabilidade de erro, respectivamente pelo teste F. (1) Dados transformados por log(n+0,5), onde n = dado amostrado. GL = graus de liberdade, CVexp. = coeficiente de variação experimental, TOTAL corresponde ao somatório de sacarose, glicose e frutose.
O teor foliar de frutose diferiu significativamente
entre as soluções S1 e S6, apresentando valores de 6,84 e 4,86 mg g-1, respectivamente. As minicepas
que receberam o tratamento com solução S1 (isento de Zn e B) apresentaram cerca de 40% a mais de teor foliar de frutose em relação às
minicepas que receberam a solução S6 (maior concentração de Zn e B). As soluções S2, S3, S4 e S5 não apresentaram diferença significativa do teor foliar de frutose em relação as demais soluções nutritivas (Tabela 4).
Tabela 4. Teor foliar de frutose (FRU) em brotações de minicepas de Eucalyptus benthamii em relação à solução de Zn e B.
Solução
FRU
( mg g-1 )
S1 6,84±1,74 A
S2 5,37±2,13 AB
S3 5,49±2,00 AB
S4 5,09±1,65 AB
S5 5,43±1,27 AB
S6 4,86±1,97 B
Nas colunas, médias seguidas por mesma letra, não diferem significativamente pelo teste de Tukey ao nível de 5% de probabilidade de erro. Dados apresentados como: média ± desvio padrão.
Ao analisar os teores foliares de sacarose verifica- se que os valores foram reduzidos em relação a solução nutritiva e coleta de brotações (Tabela 5). Apenas na 8ª coleta de brotações foi detectada a presença de teor foliar de sacarose nas brotações das minicepas de Eucalyptus benthamii, onde o maior acúmulo ocorreu para as minicepas que
foram submetidas as soluções S5 (1,54 mg g-1) e S6 (1,02 mg g-1), as quais não diferiram
significativamente. Considerando a 8ª coleta de brotações, os menores teores foliares de sacarose
foram verificados para as soluções S1, S2, S3 e S4, as quais não diferiram significativamente (Tabela 5).
Considerando cada coleta de brotações, o teor foliar de glicose das minicepas de Eucalyptus benthamii não variou significativamente em relação as soluções nutritivas avaliadas. Contudo, ao comparar as coletas de brotações dentro de cada solução nutritiva, pode-se verificar variação significativa do teor foliar de glicose para as soluções S2 e S4. A solução S2 apresentou
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diferença significativa entre a 4ª e 8ª coleta de brotações, sendo determinado 4,50 e 2,49 mg g -1
de glicose, respectivamente. Ao considerar a solução S4, pode-se observar diferença significativa entre a 4ª e 2ª coleta de brotações, apresentando 4,71 e 2,59 mg g-1 de glicose, respectivamente (Tabela 5).
O teor foliar total de carboidratos solúveis não estruturais (somatório dos teores foliares de sacarose, frutose e glicose) apresentou diferença significativa tanto ao considerar as coletas de brotações dentro das soluções nutritivas, quanto ao considerar as soluções nutritivas dentro das coletas de brotações (Tabela 5). Durante a 2ª coleta de brotações o maior valor do teor total de
carboidrato ocorreu para as soluções S1 (11,73 mg g-1) e S2 (11,29 mg g-1), as quais não diferiram
significativamente. Na 4ª coleta de brotações o
maior valor do teor total de carboidrato ocorreu para as soluções S1 (12,12 mg g-1) e S4 (12,10 mg
g-1), que não diferiram significativamente. Na 6ª coleta de brotações verifica-se que o maior valor do teor total de carboidrato ocorreu nas soluções S3 (9,76 mg g-1) e S5 (9,26 mg g-1), que não diferiram significativamente. Na 8ª coleta de brotações o maior valor do teor total de carboidrato foi registrado para as soluções S1
(9,44 mg g-1) e S5 (9,86 mg g-1), as quais
apresentaram diferença significativa em relação as demais soluções nutritivas.
Tabela 5. Teor foliar de sacarose (SAC), glicose (GLI) e total de carboidratos solúveis não estruturais (TOTAL) em brotações de minicepas de Eucalyptus benthamii em relação a coleta de brotações e solução de Zn e B.
Solução
Coleta S1 S2 S3 SAC S4 S5 S6
----------------------------------------------- ( mg g-1 ) -----------------------------------------------
2ª 0,00±0,00 Aa 0,00±0,00 Aa 0,00±0,00 Aa 0,00±0,00 Aa 0,00±0,00 Ba 0,00±0,00 Ba
4ª 0,00±0,00 Aa 0,00±0,00 Aa 0,00±0,00 Aa 0,00±0,00 Aa 0,00±0,00 Ba 0,00±0,00 Ba
6ª 0,00±0,00 Aa 0,00±0,00 Aa 0,00±0,00 Aa 0,00±0,00 Aa 0,00±0,00 Ba 0,00±0,00 Ba
8ª 0,00±0,00 Ab 0,00±0,00 Ab 0,12±0,21 Ab 0,22±0,38 Ab 1,54±0,88 Aa 1,02±0,89 Aa
Coleta
GLI
----------------------------------------------- ( mg g-1 ) -----------------------------------------------
2ª 3,27±0,60 Aa 4,28±1,19 ABa 3,29±1,03 Aa 2,59±0,62 Ba 2,80±0,56 Aa 3,05±0,35 Aa
4ª 4,49±0,69 Aa 4,50±0,94 Aa 3,47±1,24 Aa 4,71±0,87 Aa 3,98±0,44 Aa 3,15±0,50 Aa
6ª 3,37±0,89 Aa 4,03±0,97 ABa 3,85±0,46 Aa 3,68±0,15 ABa 3,93±0,38 Aa 2,77±0,36 Aa
8ª 3,77±0,60 Aa 2,49±0,33 Ba 3,77±0,43 Aa 3,45±0,62 ABa 3,82±0,84 Aa 3,14±0,58 Aa
Coleta
TOTAL
----------------------------------------------- ( mg g-1 ) -----------------------------------------------
2ª 11,73±1,71 Aa 11,29±3,46 Aa 8,25±2,08 Bc 6,49±1,59 Dd 8,31±1,31 Cc 9,93±3,39 Ab
4ª 12,12±1,75 Aa 10,90±2,81 Ab 9,76±5,24 Ac 12,10±0,74 Aa 10,40±1,32 Ab 7,34±1,00 Bd
6ª 8,99±1,82 Bbc 8,92±2,17 Bbc 9,76±0,98 Aa 8,62±0,95 Bc 9,26±0,71 Bab 7,44±1,59 Bd
8ª 9,44±1,94 Ba 5,67±0,28 Cd 8,73±1,63 Bb 7,82±1,15 Cc 9,86±1,48 ABa 7,86±2,14 Bc
Nas colunas, médias seguidas por mesma letra maiúscula e, nas linhas, médias seguidas por mesma letra minúscula não diferem significativamente pelo teste de Tukey ao nível de 5% de probabilidade de erro. TOTAL corresponde ao somatório de sacarose, glicose e frutose. Dados apresentados como: média ± desvio padrão.
Ao analisar a variação do teor total de carboidrato solúvel não estrutural em relação a cada solução nutritiva, verifica-se que as soluções S1 e S2 apresentaram os maiores valores durante a 2ª e 4ª coletas de brotações, sendo registrada redução do teor total de carboidrato até a 8ª coleta de brotações. A solução S3 apresentou o maior valor do teor total de carboidrato durante a 4ª e 6ª coletas de brotações, as quais não diferiram significativamente. Em relação a solução S4, o
maior valor do teor total de carboidrato ocorreu somente na 4ª coleta de brotações. Em relação a solução S5 o maior valor do teor total de carboidrato ocorreu na 4ª e 8ª coletas de brotações. A solução S6 apresentou o maior valor do teor total de carboidrato somente na 2ª coleta de brotações (Tabela 5). Em termos gerais, com o aumento das concentrações de Zn e B na solução nutritiva ocorreu redução dos teores foliares de
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carboidratos solúveis não estruturais, sendo que a frutose foi a mais afetada.
DISCUSSÃO
Os carboidratos são importantes fontes de energia e carbono estrutural para o metabolismo vegetal, regulando reações bioquímicas para a manutenção do crescimento e desenvolvimento vegetal (Corrêa et al., 2005; Pavlinova et al., 2002; Stenvall et al., 2009; Taiz e Zeiger, 2009; Veyres et al., 2008). Além disso, existem evidências de uma forte interação do teor de carboidratos com o nível hormonal endógeno, sendo que esse efeito está diretamente relacionado com o processo morfogênico e/ou organogênico (Coruzzi e Zhou, 2001; Komatsu et al., 2011). Adicionalmente, o enraizamento em propágulos demanda consumo de energia, e o manejo do minijardim clonal visando adequar os teores de carboidratos na planta matriz se torna essencial para a obtenção de resultados satisfatórios durante a clonagem de genótipos selecionados (Agulló-Antón et al., 2011; Ragonezi et al., 2010; Xavier et al., 2009).
A solução nutritiva isenta de Zn e B (S1) induziu maior acúmulo de frutose nos tecidos foliares das minicepas de Eucalyptus benthamii, indicando uma correlação da nutrição mineral com o acúmulo dessa forma de carboidrato nos tecidos foliares apicais. Resultado semelhante foi reportado por Leite et al. (2008) que verificaram aumento do teor foliar de arabinose na ausência de boro para Eucalyptus grandis. Contudo, em outro estudo, a suplementação de B na solução nutritiva induziu aumento do acúmulo dos teores foliares de manitol e sorbitol para Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla e Eucalyptus grandis (Leite et al., 2010), sendo que os autores sugerem estreita correlação do elemento B com a síntese de carboidratos específicos e a sua mobilidade na planta.
Os teores reduzidos de sacarose eram esperados, tendo em vista as amostras foliares serem oriundas da ponteira (meristema apical) das brotações das minicepas de Eucalyptus benthamii. Nessas regiões meristemáticas a atividade metabólica é mais elevada (regiões fisiologicamente ativas), sendo comum ocorrer formas de carboidratos mais reduzidos que são utilizados como fontes energéticas para as diversas reações bioquímicas, como a frutose e glicose (Veyres et al., 2008). O carboidrato na forma de sacarose apresenta mobilidade na planta, sendo facilmente translocado para outras regiões de crescimento
não-fotossintetizantes, como caule e raiz (Mindêllo Neto, 2005) onde geralmente, apresenta-se em maior concentração (Taiz e Zeiger, 2009).
O teor de foliar de glicose não variou em relação as soluções nutritivas, contudo a maior diferença ocorreu entre as épocas de amostragem. Esse resultado está de acordo com o relatado para diversas espécies de plantas, onde o acúmulo de carboidrato varia em relação aos efeitos da sazonalidade ao longo do ano (Kersten et al., 1993; Mindêllo Neto, 2005). Além disso, o manejo de poda do minijardim clonal também pode ter contribuído para ocasionar alterações dos teores de carboidratos (Borba et al., 2005). Nesse sentido, Torres (2003) observou que as brotações mais aptas para o emprego da miniestaquia estão diretamente relacionadas ao aumento dos níveis de carboidratos de acordo com a época do ano e do intervalo entre as coletas de brotações. O autor salienta que o aumento da periodicidade entre as coletas de brotações resulta no aumento da área foliar específica, permitindo assim, maior produção de fotoassimilados, incrementando os teores endógenos de carboidratos.
Em termos gerais, os teores foliares dos carboidratos solúveis não estruturais (glicose, frutose e sacarose) para as minicepas de Eucalyptus benthamii foram afetados pelas soluções nutritivas e coletas de brotações ao longo do tempo, e os valores assemelharam-se aos reportados para estudos in vitro com Eucalyptus grandis, o qual apresentou variação de 5,50 a
14,90 mg g-1 em diferentes meios de cultura
(Correia, 2006), para Eucalyptus urophylla, que apresentou variação de 6,9 a 11,7 mg g-1 em
relação a diferentes concentrações de boro
(Trevisam, 2001) e para Eucalyptus urophylla que variou de 2,2 a 12,2 mg g-1 em relação a diferentes
concentrações de boro e cálcio (Trevisam, 2005). Outros efeitos em relação ao acúmulo de carboidratos também podem estar relacionados as variações da temperatura. Floriani et al. (2011) verificaram correlação negativa entre a elevada temperatura com a concentração de carboidratos solúveis totais no tecido foliar de Eucalyptus dunnii, bem como, correlação com a tolerância ao frio com o aumento do acúmulo de carboidrato. Os autores sugeriram que a determinação da concentração foliar de carboidratos solúveis totais em mudas de Eucalyptus dunnii pode ser característica quantitativa a ser considerada na seleção de espécies tolerantes ao frio em
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programas de melhoramento. Futuros estudos poderão demonstrar a aplicabilidade desse efeito para o Eucalyptus benthamii em termos de sua tolerância a baixas temperaturas, tendo em vista que os efeitos em nível fisiológico na propagação clonal de plantas com as interações entre os teores de carboidratos, hormônios, nutrientes, bem como, fatores ambientais como luz e temperatura, não estão totalmente compreendidos (Hartmann et al., 2011; Ragonezi et al., 2010).
CONCLUSÕES
O teor foliar de sacarose, glicose e total de carboidratos solúveis não estruturais em minicepas de Eucalyptus benthamii variaram em relação a coleta de brotações e solução nutritiva. O teor foliar de frutose variou somente em relação a solução nutritiva.
Em termos gerais, com o aumento das concentrações de Zn e B na solução nutritiva ocorreu redução dos teores foliares totais de carboidratos solúveis não estruturais, sendo que a frutose foi a mais afetada.
AGRADECIMENTOS
À FAPESP (Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo) e CAPES (Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior) pelo suporte financeiro. À Planflora Mudas Florestais pela disponibilização dos materiais genéticos de Eucalyptus benthamii. Os autores também agradecem ao José Roberto Romanini e ao Fabrício Augusto Hansel pelo suporte laboratorial.
RESUMO
Objetivou-se avaliar os teores foliares de carboidratos solúveis não estruturais de minicepas de Eucalyptus benthamii em relação a diferentes concentrações de Zn e B ao longo de sucessivas coletas de brotações. As brotações foram oriundas de minicepas fertirrigadas com soluções nutritivas variando nas concentrações de
Zn e B (S1 – isento de Zn e B, S2 – 0,5 mg L-1 de Zn, S3 – 0,5 mg L-1 de B, S4 – 0,5 mg L-1 de Zn e B, S5 – 1,0 mg L-1 de Zn e B, S6 – 2,0 mg L-1 de Zn e B), sendo
realizadas oito coletas de brotações do minijardim clonal. O teor foliar total de carboidratos solúveis não estruturais (sacarose, glicose e frutose) foi determinado na 2ª, 4ª, 6ª e 8ª coletas de brotações. O aumento das concentrações de Zn e B na solução nutritiva reduziu os teores foliares totais de carboidratos solúveis não estruturais, sendo a frutose a mais afetada.
Palavras-chave: Solução nutritiva, fertirrigação, miniestaquia, glicose, frutose, sacarose
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